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蛋白质胶条质谱鉴定 蛋白质胶条质谱鉴定-详情蛋白质胶条鉴定蛋白质胶条是蛋白样品经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)后所得到的相互分离的蛋白条带。在电场作用下,蛋白质在聚丙烯凝胶中按照分子量大小进行迁移,形成不同的蛋白条带,每一条蛋白条带中的蛋白质可能是相同的也可能是分子量相同或相似的不同蛋白质,可能是已知的也可能是未知的,这些蛋白胶条可以切割下来,对所含的蛋白质做进一步的鉴定,即蛋白质胶条鉴定。蛋白质胶条质
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2023-09-18 |
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iTRAQ与Label Free iTRAQ与Label Free-详情"蛋白质是由氨基酸组成的有机生物大分子,一切生命活动都离不开蛋白质,其在体内的动态变化过程(如种类和含量的变化)揭示了生命活动的变化过程。定量蛋白质组学就是对一个体系内所有蛋白质含量进行精确地鉴定,以揭示某项生命活动的本质。定量蛋白质组学技术可分为标记(iTRAQ等)和非标记(Label Free)两类。iTRAQiTRAQ (isobaric tags for relative and absolute quantitation)是一种基于标签的蛋白质
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2023-09-18 |
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如何查找质谱结果中的磷酸化位点 如何查找质谱结果中的磷酸化位点-详情"磷酸化蛋白组的研究内容中,位点分析是zuì重要的一个环节。不同磷酸化位点在生物学进程和分子功能上有不同的生物学意义。由于大多数磷酸化蛋白都有多个磷酸化位点,而且其磷酸化位点是可变的,所以对单一磷酸化蛋白质进行研究的传统方式,例如磷酸化抗体验证的方法显然不能满足磷酸化蛋白组的研究的多样性和复杂性,大分子生物质谱成为磷酸化蛋白鉴定zuì常用的技术手段。如何查找质谱结果中
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2023-09-18 |
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Edman测序的局限性 Edman测序的局限性-详情"鉴定蛋白质的zuì准确方法是利用蛋白质测序方法,蛋白质测序的两种主要方法是Edman降解法和质谱法。Edman测序补充了质谱测序技术,并且在测序动物肽(无序列数据库可用)方面优于质谱测序。Edman测序的关键是试剂苯基异硫氰酸酯(PITC),其被称为Edman试剂。蛋白质的N端在未封闭的情况下,在碱性pH下PITC容易与肽的N端α残基相互作用,从而产生苯硫代氨基甲酰氨基酸衍生物。在不破坏被测序的肽中其他残基
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2023-09-18 |
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Edman降解法测序反应条件 Edman降解法测序反应条件-详情"Edman降解(Edman degradation)法即在弱碱性条件下使蛋白质肽链N末端游离α残基与异硫氰酸苯酯(PITC)反应,然后用酸处理,从多肽链上仅使氨基末端残基以氨基酸的苯基乙内酰硫脲(PTH)衍生物的形态游离出来,然后测序并进行序列分析。Edman降解法测序是通过一次次循环反应完成的,在每一轮的循环步骤中都包含偶联、裂解、转化以及氨基酸识别过程,其反应条件如下所示:偶联条件:以气态形式输送12
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2023-09-18 |
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Edman测序法的主要原理 Edman测序法的主要原理-详情"Edman降解(Edman degradation)是从蛋白质多肽链游离的N末端测定氨基酸残基的序列的过程,其通过循环耦联-环化裂解-转化-PTH-氨基酸鉴定这一系列化学反应实现蛋白/多肽N端氨基酸的鉴定,深入了解Edman降解法测序的主要原理对蛋白质有序的氨基酸组成的分析具有指导意义。耦联:即在碱性环境下,Edman试剂苯基异硫氰酸酯(PITC)与蛋白质或多肽链的N末端的α-氨基反应,形成末端残基的苯硫代氨基甲酰基
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2023-09-18 |
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Edman化学降解的原理和反应特点 Edman化学降解的原理和反应特点-详情"Edman降解法(Edman degradation method)是由菲尔•埃德曼(Pehr Edman)shǒu先创立,用于肽链或蛋白质N-末端氨基酸序列分析的常用方法,其反应原理和反应特点如下所述。Edman降解法原理是异硫氰酸苯酯(PITC)在弱碱(TMA)条件下与蛋白质N端的α-氨基偶联生成苯氨基硫甲酰肽(PTC-AA),然后在无水强酸(TFA)条件下,N端的第yī个残基从完整的多肽蛋白链上以2-苯氨基噻唑啉酮(ATZ-AA)的
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2023-09-18 |
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Edman蛋白N端测序 Edman蛋白N端测序-详情"几乎所有的蛋白质合成都起始于N-端,蛋白翻译后在细胞内会发生剪切和修饰,通常不能简单地依据基因序列对蛋白质N-端序列进行预测,而是需要对蛋白质的一级结构直接测定。因此,蛋白质N端测序分析对于生物医药等相关研究有着巨大的影响。Edman降解(Edman degradation)又称Edman测序,基于Edman降解法的蛋白质N-端测序分析是由埃德曼(P.Edman)创立的一种测定蛋白质一级结构氨基酸序列的方法。其涉及循环化
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2023-09-18 |